باسیل‌های گرم منفی غیر تخمیر کننده

باسیل‌های گرم منفی غیر تخمیر کننده

شناسایی استنوتروفوموناس مالتو-فیلیا توسط Plate Uni-N/F-Tek

شناسایی استنوتروفوموناس مالتو-فیلیا توسط Plate Uni-N/F-Tek، این پلیت شامل ۱۳ آزمایش: H2S، ایندول، گلوکز، گزیلوز، مانیتول، لاکتوز مالتوز، استامید، اسکولین، اوره، DNase و ONPG می‌باشد. واکنش‌های استنوتروفوموناس مالتوفیلیا روی این پلیت:

GLU XYL MAN LAC MAL ACET
Weak 0 0 0 + 0

 

ESC Urea DNase ONPG H2S IND
+ + + + 0 0

محیط اکسیداتیو و تخمیری با استفاده از گلوکز (OF)

محیط اکسیداتیو و تخمیری با استفاده از گلوکز(OF)، باکتری‌ها می توانند کربوهیدرات‌ها را از هردو راه اکسیداتیو و تخمیری مورد استفاده قرار دهند. انجام این واکنش‌ها در محیط OF حاوی برمو‌تیمول بلو برای تعیین PH  تشخیص داده می‌شود. پایین بودن نسبت پروتئین به کربوهیدرات در محیط OF موجب جلوگیری از خنثی شدن اسید ضعیف به وسیله ترکیبات قلیایی حاصل از پروتئین‌ها می‌شود. مثبت بودن آزمایش در شرایط هوازی در دمای ۳۷Cº پس از ۲۴ ساعت در سودوموناس آئروژینوزا با تولید رنگ زرد در بالای لوله مشخص می‌شود (سمت راست) و تحت شرایط بی‌هوازی با پوشش روغن رشدی مشاهده نمی‌شود (سمت چپ).

محیط اکسیداتیو و تخمیری با استفاده از گلوکز (OF)

محیط اکسیداتیو و تخمیری با استفاده از گلوکز (OF)، آلکالیژنس فکالیس (A.faecalis) بعد از ۲۴ ساعت انکوباسیون در دمای ۳۷Cº ، این نتیجه نشان‌دهنده آن است که این باکتری ساکارولیتیک نمی‌باشد و توانایی استفاده از گلوکز را تحت شرایط اکسیداتیو یا تخمیری ندارد. در شرایط بی‌هوازی هیچ تغییر رنگی مشاهده نشده است (سمت چپ). در شرایط هوازی بالای محیط کشت آبی رنگ شده که به علت مصرف پپتون و تولید آمین، PH افزایش یافته و شرایط قلیایی ایجاد می‌شود (سمت راست).

محیط اکسیداتیو و تخمیری با استفاده از گلوکز (OF) در سودوموناس آئروژینوزا

محیط اکسیداتیو و تخمیری با استفاده از گلوکز (OF) در سودوموناس آئروژینوزا، 
A. انکوباسیون سودوموناس آئروژینوزا در دمای ۳۷Cº بعد از ۲۴ ساعت: تغییر PH فقط در قسمت فوقانی لوله تحت شرایط هوازی
B. انکوباسیون سودوموناس آئروژینوزا در دمای ۳۷Cº بعد از ۴۸ ساعت: انتشار اسید به قسمت پایین‌تر لوله تحت شرایط هوازی
C. انکوباسیون سودوموناس آئروژینوزا در دمای ۳۷Cº بعد از ۵ روز: انتشار اسید به تمام لوله تحت شرایط هوازی، بهترین نتیجه زمان بین ۲۴ تا ۴۸ ساعت است.

سودوموناس آئروژینوزا روی آگار خون دار %۵ تهیه شده از خون گوسفند

سودوموناس آئروژینوزا روی آگار خون دار %۵ تهیه شده از خون گوسفند، کلنی‌های بتا همولیتیک و پیگمـان‌دار (Transmitted light) 

سودوموناس آئروژینوزا با پیگمان آبی (Reflected light)

سودوموناس آئروژینوزا با پیگمان آبی (Reflected light).

کلنی اسینتـوبـاکتــر باومـانی (A.baumanii) روی آگار EMB

کلنی اسینتـوبـاکتــر باومـانی (A.baumanii) روی آگار EMB، باسیل گرم‌منفی یا کوکوباسیل غیرتخمیر‌کننده گلوکز، کلنی‌ها با مرکز آبی- خاکستری مشاهده می‌شوند. توجه شود که با تخمیر‌کننده‌های لاکتوز روی محیط EMB اشتباه نشود. این باکتری از نظر میکروسکوپی با گونه‌های نایسریا و موراکسلا قابل اشتباه است.

استنـوتـروفومـونـاس مـالتوفیلیا (S.maltophilia) روی آگــار EMB

استنـوتـروفومـونـاس مـالتوفیلیا (S.maltophilia) روی آگــار EMB، باسیل گرم‌منفی غیر‌تخمیر‌کننده گلوکز، رشد خوبی روی محیط کشت داشته و ظاهر کلنی‌های غیر‌تخمیر‌کننده لاکتوز را دارد.

کلنی‌های غیر‌تخمیر‌کننده لاکتوز سودوموناس آئروژینوزا روی محیط کشت

کلنی‌های غیر‌تخمیر‌کننده لاکتوز سودوموناس آئروژینوزا روی محیط کشت، رشد زیاد در کشت تازه که آغاز تولید پیگمان آبی- سبز را نشان می‌دهد.

اسینتو باکتر باومانی روی محیط مک‌کانکی

اسینتو باکتر باومانی روی محیط مک‌کانکی، اگرچه این باکتری لاکتوز را تخمیر نمی‌کند اما به طور قوی لاکتوز را اکسید کرده، اسید کمی ایجاد کرده و کلنی‌های صورتی یا بنفش کم‌رنگ روی مک‌کانکی آگار تشکیل می‌دهد اما روی آگار خون‌دار پیگمان تولید نمی‌کند. این باکتری اکسیداز منفی است.

اکسیداز مثبت و منفی (معـرف کواکس)

A. اکسیداز مثبت (معرف کواکس) 
B. اکسیداز منفی (معـرف کواکس) 

سودوموناس آئروژینوزا، اکسیداز مثبت و استنوتروفوموناس مالتوفیلیا و اسینتوباکترباومانی، اکسیداز منفی هستند.

تشخیص سودوموناس آئروژینوزا با استفاده از لوله GNF، تست اوره، آگار سودوسل (42P)

تشخیص سودوموناس آئروژینوزا با استفاده از لوله GNF، تست اوره، آگار سودوسل (42P)، این سیستم برای تشخیص باسیل‌های گرم‌منفی غیر‌‌انتروباکتریاسه به کار می‌رود. در محیط GNF (لوله سمت چپ) میکرو ارگانیسم پیگمان فلئورسنت تولید کرده است که زیر لامپ Wood قابل مشاهده است. رنگ قرمز در پایین لوله به علت تولید گاز N2 می‌باشد. سودوموناس آئروژینوزا نمی‌تواند گلوکز را تخمیر کند. در لوله وسط نتیجه مثبت تست اوره نشان داده شده است. لوله سمت راست حاوی محیط 42P است که به آن آگار سودوسل نیز گفته می‌شود. این محیط به مدت ۱۸ تا ۲۴ ساعت در دمای ۴۲Cº انکوبه می‌شود. همان‌گونه که نشان داده شده است، فقط سودوموناس آئروژینوزا می‌تواند در این شرایط رشد کند.

اسفینگـومونـاس پاسیموبیلیس (S. paucimobilis) روی آگار خون دار %۵ تهیه شده از خون گوسفند

اسفینگـومونـاس پاسیموبیلیس (S. paucimobilis) (اســـم قبـلـی آن سودوموناس پاسیموبیلیس بوده است) روی آگار خون دار %۵ تهیه شده از خون گوسفند، کلنی‌های این باکتری روی آگار خون‌دار پس از ۲۴ ساعت انکوباسیون کوچک و با پیگمان زرد رنگ می‌شود. رشد نرمال این گونه‌ها در دمای Cº 30 می‌باشند و نمی‌توانند در دمای ۴۲Cº رشد کنند. این باکتری‌ها روی مک‌کانکی رشد نکرده اکسیداز، ONPG، اسکولین و DNase مثبت و نیترات و ایندول منفی هستند.

استنوتروفومونـاس مـالتوفیلیا (گزانتوموناس) روی آگار خون دار %۵ تهیه شده از خون گوسفند

استنوتروفومونـاس مـالتوفیلیا (گزانتوموناس) روی آگار خون دار %۵ تهیه شده از خون گوسفند، این باکتری روی آگار خون‌دار کلنی‌های سبز یا بنفش کمرنگ با بوی زیاد آمونیاک می‌دهند. بر‌خلاف سودوموناس‌های دیگر این گونه اکسیداز منفی هستند به تعداد زیادی از آنتی‌بیوتیک‌ها مقاوم اما معمولاً به کوتریموکسازول حساس هستند.

کلنی‌های شیوانلا (سودوموناس) پوتری فاسینس (S.putrefaciens) روی آگار خون دار %۵ تهیه شده از خون گوسفند

کلنی‌های شیوانلا (سودوموناس) پوتری فاسینس (S.putrefaciens) روی آگار خون دار %۵ تهیه شده از خون گوسفند، کلنی‌های این باکتری روی آگار خون‌دار کمی چسبناک، موکوئیدی و صورتی رنگ متمایل به قرمز یا قهوه‌ای می‌باشند. این باکتری قبلاً جزء جنس سودوموناس‌ها قرار می‌گرفت.

واکنش شیوانلا پوتری فاسینس روی محیط TSI

واکنش شیوانلا پوتری فاسینس روی محیط TSI، این باکتری بر‌خلاف سایر باکتری‌های شایع غیر‌ تخمیر‌کننده مقدار زیادی H2S روی محیط شیب‌دار TSI یا KIA تولید می‌کند.

فلاو باکتریوم منینگو سپتیکوم (F.meningosepticum) روی آگار خون دار %۵ تهیه شده از خون گوسفند

فلاو باکتریوم منینگو سپتیکوم (F.meningosepticum) روی آگار خون دار %۵ تهیه شده از خون گوسفند، کلنی‌های این باکتری روی آگار خون دار پس از ۴۸ ساعت انکوباسیون قطر حدود ۳ میلی‌متر دارند. اکثر سویه‌ها اکسیداز مثبت هستند و رشد روی مک‌کانکی متغیر می‌باشد. این گونه غیر‌متحرک است و ایندول، اسکولین، ONPG و DNase مثبت بوده و اوره منفی می‌باشد.

بورخولدریا (سودوموناس) سپاسیه (B.cepacia) روی آگار خون دار %۵ تهیه شده از خون گوسفند

بورخولدریا (سودوموناس) سپاسیه (B.cepacia) روی آگار خون دار %۵ تهیه شده از خون گوسفند، این باکتری یک پاتوژن با اهمیت بوده که در بیماران مبتلا به سیستیک فیبروزیس عفونت مجرای تنفسی ایجاد کرده و به طور شایعی با عفونت‌های بیمارستانی در ارتباط می‌باشد. کلنی‌های این باکتری پس از انکوباسیون طولانی مدت روی مک‌کانکی قرمز براق می‌باشد که در ارتباط با اکسیداسیون لاکتوز است همچنین این گونه اکسیداز مثبت بوده اگر چه برخی از سویه‌ها به طور ضعیف اکسیداز مثبت هستند. اغلب سویه‌های این باکتری لیزین دکربوکسیلاز مثبت هستند.

لژیونلا پنوموفیلا (L.pneumophila) روی محیط کشت عصاره مخمر

لژیونلا پنوموفیلا (L.pneumophila) روی محیط کشت عصاره مخمر- شارکول بافره شده (BCYE)، این محیط کشت یک محیط انتخابی جهت جدا‌سازی گونه‌های لژیونلا می‌باشد. به دلیل این که لژیونلا‌ها به ال_سیستئین نیاز دارند و رشد آن‌ها در حضور آهن افزایش می‌یابد و این محیط مکمل‌های غذایی مورد نظر را تامین می‌کند همچنین برای جلوگیری از رشد باکتری‌ها به این محیط کشت آنتی‌بیوتیک‌هایی اضافه می‌شود. کلنی‌ها پس از ۲ تا ۳ روز با ظاهر گرد، صاف و براق (ظاهر زمینه شیشه‌ای) با قطر حدود ۱ تا ۳ میلی‌متر و در حضور ۳ تا ۵ درصد CO2 رشد می‌کنند.